野油菜黄单胞菌是目前生产黄原胶的最好菌 种，但其最大缺点是不稳定，易自发突变，影响多糖 的合成，在连续和分批发酵中都观察到菌株的变异 现象，出现大(L),小(S)两种菌落，其中L型菌落产生 的多糖收率正常，具有正常的流变学特性，而S型产 生的多糖收率低，且性能不合要求。
菌种不稳定问题多是保藏方法不当并频繁地传 代所引起的。适宜的长期保藏方法是用标准的冷冻 干燥法，以及把细胞保存在干滤纸条上，为期一年。 以上两方法的缺点是：都需要特殊的实验室设备，保 藏成本高，且实际操作步骤复杂，实用性差。
我们经过多年的实验，对黄原胶菌种长期保藏 采用矿物油保藏法，此法简单易操作，保存菌种存活 率高，最长保存时间可达5~6年。菌种保藏5年后， 经测定，摇瓶发酵液平均粘度为原菌种的81.7%,产 胶率87.6%,各种性能基本保持不变，保存效果理想。
1材料与方法 1.1菌种从山东大学引进一株野油菜黄单胞菌，经过纯 化、选优及初步的鉴定工作，并命名为MH-8603。菌 株形态表现为细胞单个，直杆状，直径〇。4~0.5(xm，长 度革兰氏染色阴性，产荚膜和鞭毛，在肉 汁胨培养基上，24h生长好菌落，菌落呈黄色粘稠状， 液体培养时可形成浅黄色粘稠的胶状物。
1.2制备矿物油选用优质无色、中性、比重为0.8~0.9g/?n3的矿 物油，装人三角瓶中，加棉塞，用防潮纸包好，98MPa 灭菌30min取出，置于40^；温箱中蒸发水分，或于 110~170尤烘箱去水分，经无菌检查后备用。
1.3菌种培养将需要保藏的黄原胶菌种接种在葡萄糖琼脂斜 面上，于28~30T；恒温箱培养48h(斜面宜短，最好不 要超过试管的1/3)，以得到健壮的菌体细胞，备用。
1.4灌注石蜡油在无菌条件下，用无菌吸管吸取已灭过菌的矿 物油，注人已培养好的新鲜的斜面菌体细胞上，以高 于斜面项端l~3cm为准，使菌体与空气隔绝。
1.5保藏将已灌注矿物油的菌种斜面以直立状态置于低 温（51左右）干燥处保藏。
1.6恢复培养在移接或再培养时，先沿试管壁倒去附在菌体 上的矿物油，将菌体移接在适宜的斜面培养基上，生 长繁殖后上摇瓶，测粘度与产胶率。一般情况下，要 进行生产，需经分离复壮。
1.7黄原胶粘度测定NDJ-1型旋转粘度计，3号转子，转子转速60r/min。
1.8发酵黄原胶产胶率测定称取l〇g发酵液，加5mL 20%的KC1溶液，搅拌后 用30mL工业酒精使黄原胶沉淀，去除上清液，沉淀再 用20mL工业酒精脱水，7CH：真空烘干至恒重，称干重。
2实验结果见表1。从表1可见，此方法保藏菌种从第6年 起染菌机会增多，存活率明显下降，矿物油出现变质 发黑现象。因此，保藏期应控制在5年内。
3结论野油菜黄单胞菌是生产黄原胶的最好菌种，我 们对黄原胶菌种采用不常用的矿物油保藏法，保藏 时间长，菌株存活率高，菌种各种性状保存良好，最 长保存时间可达5~6年，且操作简单易行。
(下转第142页）
食品添加剂Science and Technology qf Food Industry61g。凝胶强度随着质量分数的增加而增加，溶液中 质量分数越高，分子间相互缠结形成网状结构比较 致密，因而凝胶的强度增大。
2.5.2不同量的Ca2+对凝胶强度的影响阳离子 K+、Ca2+等会影响凝胶强度\我们在以上三个不同质 量分数的凝胶中分别添加了不同量的Ca2+,观察Ca2+ 对燕麦P-葡聚糖凝胶强度的影响，结果见表2。
表2添加不同量的Ca2+对燕麦p-葡聚糖凝胶强度的影响P-葡聚糖浓度(％)Ca2+添加量 (mg/100mL)凝胶强度 (g)时间(S)距离(mm)
62015.99.87519.74372025.29.94019.87582045.09.99519.98564018.79.98519.98774024*99.99019,98084052.39.99019.97866042.69.89519.98876085.19.96019.915860162.210.00520.000从表2可见，燕麦（3-葡聚糖凝胶的强度随着 Ca2+添加量的增加而增加，添加20mg的Ca+之后，三 个不同质量分数燕麦P-葡聚糖形成的凝胶强度比 不加时有所下降，而高浓度的Ca2+(40、60mg/100mL) 则会使凝胶强度增加。造成这种作用的机理有待于 进一步研究。
3讨论与结论根据以上实验结果，我们得出实验结论：高分子 量的燕麦P-葡聚糖在溶液中形成较高粘度的溶液， 是呈溶胶状态的，不易形成凝胶。管骁等研究表明 P-葡聚糖溶液形成的髙粘度溶液表现出明显的假塑 性流体性质，在食品工业中可应用在增稠剂、稳定剂 等方面。而低分子量的燕麦P-葡聚糖则可以形成凝 胶，Doublier等W就通过动态粘弹性的测量观察到解 聚或部分水解的燕麦P-葡聚糖可以形成凝胶。 Susan M. Tosh等研究表明，分子量在燕麦P-葡聚 糖的凝胶形成中起着重要的作用，低分子量的样品 比高分子量的样品更易形成凝胶，且与温度有关，温 度较高时分子能很好地分散，而低温时则趋向于聚 集。从实验结果可知，燕麦P-葡聚糖凝胶的形成和它 的粘度、浓度、分子量、温度等因素有关，低粘度、低 分子量、高浓度、低温可以促进燕麦P-葡聚糖凝胶的 形成。B6hme and Kulicke关详细研究了大麦（3-葡聚 糖的凝胶行为，认为葡聚糖凝胶的形成和其结构、 分子量、存放时间以及剪切等因素有关。
转载请注明：山东东达纤维素有限公司（http://www.sdcmcchina.com/)，是专业的羧甲基纤维素钠，羧甲基淀粉钠，黄原胶生产型企业，专业生产羧甲基纤维素钠，羧甲基淀粉钠,黄原胶。拥有雄厚的技术力量，先进的生产工艺和设备。东达纤维素有限公司全体员工为海内外用户提供高技术,高性能，高质量的产品。热忱欢迎国内外广大客户合作共赢。